Triple Sugar Iron Agar

Triple Sugar Iron Agar


Mục đích:
Triple sugar iron (TSI) agar là 1 mt phân lập dùng trong việc
xác định lên men carbohydrate và sinh H₂S.Khí trong chuyển hóa
carbohydrate cũng được tìm thấy.vk có thể chuyển hóa carbohydrates với oxygen
hoặc lên men (ko oxygen).
TSI phân biệt vk dựa trên sự lên men lactose,glucose,sucrose
và trên sự sản xuất hydrogen sulfide.
Thường dùng trong định danh Enterobacteriaceae và các vk G-
khác.
Lí thuyết:
TSI chứa 3 loạicarbohydrate :glucose(0.1%), sucrose(1%),
lactose(1%) .Giống KIA ngoại trừ KIA chứa 2 loại cacbohydrate :glucose(0.1%)
,lactose(1%). Ngoài ra còn chứa beef extract,yeast extract,peptones là nguồn
cung cấp N,Vitamin,khoáng chất.Phenol red là chất chỉ thị màu,thạch cứng.Ống thạch
nghiêng,bề mặt dốc hiếu khí,bề sâu kị khí.
Khi lên men carbohydrates,pH giảm là nguyên nhân của sự đổi
từ màu cam hơi đỏ sang vàng.màu đỏ là do peptones.Sodium thiosulfate trong mt bị
khử thành hydrogen sulfide,khí ko màu.H₂S tác dụng với Fe²⁺
tạo FeS(kết tủa đen).
Các trường hợp có thể xảy
ra:
Len men glucose:phản ứng trong ống là K/A biểu thị chỉ có glucose bị chuyển hóa.vk nhanh
chóng chuyển hóa glucose,lúc đâu bề mặt acid,phần sâu acid(A/A) trong vài giờ.
Theo con đường EMP trong cả kị và hiếu khí sản xuất ATP và pyruvate
Trên bề mặt, pyruvate chuyển hóa thành CO₂,H₂O,và năng lượng.sau khoảng hơn 18h
glucose xài hết,nhưng vk ko sử dụng được lactose và sucrose,peptone được sử dụng
như là nguồn năng lượng(trên bề mặt đk hiếu khí).Sử dụng peptone là lí do của
giải phóng NH₃ làm tăng pH,nên chỉ thị phenol red đổi màu từ vàng
sang đỏ.
Trong đk kị khí phần sâu,vk sử dụng con đường EMP để chuyển hóa glucose thành ATP và pyruvate,cái mà bị cải tạo thành sản phẩm tính acid bền vững,vì vậy phần sâu mang tính acid.
Kết quả ghi:K/A.thường là các vk: Citrobacter freundii* , Citrobacter koseri*,
and Morganella morganii*
Lên men glucose,lactose và/hoặc sucrose:phản ứng là A/A
Sau 18h glucose xài hết vk sẽ xài lactose và/hoăc sucrose.kết
quả ghi A/A
Dài hơn khoảng 48h,lactose và sucrose cạn kiệt,bề mặt nghiêng trở lại pH kiềm do chuyển hóa peptones.
Trong mt kị khí,vk chuyển pyruvate thành sản phẩm cuối cùng tính acid bền vững vì vậy phần sâu mang tính acid.
Bao gồm: Enterobacter aerogenes, E. cloacae, Escherichia
coli, Klebsiella oxytoca, and K. pneumoniae.
Không lên men glucose,lactose và sucrose:phản ứng
là K/K or K/NC
1 số vk ko thuộc họ đường ruột như Pseudomonads ko có khả
năng lên men 3 loại đường này.chúng lấy năng lượng từ peptones trong cả kị và
hiếu khí.nên phenol red chuyển màu từ hồng sang đỏ.nếu chỉ chuyển hóa trong mt
hiếu khí thì ở phần sâu màu thạch ko đổi.
Bao gồm: Acinetobacter spp. and Pseudomonas spp.
Sinh khí: CO₂,O₂,làm nứt thạch,đẩy thạch.thường
đi chung với kết quả A/A.
Bao gồm: Enterobacter aerogenes, E. cloacae, Escherichia
coli, Klebsiella oxytoca, and K. Pneumoniae
Lên men glucose và sản phẩm hydrogen sulfide:
Lên men glucose..........
Kết tủa đen biểu thị cho vk có khả năng tạo H₂Stừ sodium thiosulfate.Vì H₂S
ko màu,ferric ammonium citrate được dùng tac1 dụng vơi nó taọ ferrous sulfide.sự
hình thành H2S đòi hỏi trong mt acid nên dù màu vàng phần sâu ko thấy vì kết tủa
đen nhưng phần sâu có tính acid.kết quả K/A vơi H2S.
Gồm: Citrobacter freundii*, Edwardsiella tarda, Proteus mirabilis*, and Salmonella
spp*
Lên men 3 đường và sinh H2S:A/A với H2S
Gồm: Citrobacter freundii*, Proteus mirabilis*, and P.vulgaris*.
Không lên men glucose nhưng sinh H2S:phản ứng K/NC
Sự khử thioslfate đòi hỏi có H⁺,nhưng ko len men ko tạo được mt acid.Cysteine và có lẽ những phân tử sulfate hưu cơ bị chuyển hóa thành pyruvate acid ,NH3,H2S.
Thường ở thành viên nhóm Shewenella.


Pancreatic digest of casein USP (seeNote) 10.0g
Peptic digest of animal tissue USP(see Note) 10.0g
Glucose 1.0g
Lactose 10.0g
Sucrose 10.0g
Ferrous sulfate or ferrous ammonium sulfate 0.2g
NaCl 5.0g
Sodium thiosulfate 0.3g
Phenol red 0.024g
Agar 13.0g
Distilled water 1,000mL